NK 2B4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421915

Descripción general

Cd244 codifica NK 2B4 (CD244), un inmunorreceptor de la familia SLAM expresado en las células NK de ratón y en subpoblaciones de células T, que modula la citotoxicidad y la producción de citocinas mediante interacciones con CD48. La señalización está mediada por motivos ITSM citoplásmicos que reclutan proteínas adaptadoras como SAP/SH2D1A o EAT-2, configurando redes de fosforilación aguas abajo que ajustan las salidas activadoras frente a las inhibitorias. A través de estas vías, CD244 contribuye a la formación de la sinapsis inmunológica, el reconocimiento de células diana y la regulación de las respuestas inflamatorias. Las alteraciones en la señalización de CD244 se han asociado con una inmunidad antiviral y antitumoral desregulada, el agotamiento funcional de las células NK y el desequilibrio inmunitario en contextos de inflamación crónica y en modelos de neoplasias hematológicas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NK 2B4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cd244 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cd244 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cd244 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NK 2B4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cd244 para la investigación de la señalización de NK 2B4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cd244 críticos para la función de NK 2B4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cd244 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NK 2B4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NK 2B4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cd244. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NK 2B4 (m) y el plásmido HDR NK 2B4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cd244 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cd244 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.