NK 2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421915

概要

Cd244 は、マウスのナチュラルキラー（NK）細胞および一部の T 細胞に発現する SLAM ファミリー免疫受容体である NK 2B4（CD244）をコードし、CD48 との相互作用を介して細胞傷害活性やサイトカイン産生を調節します。シグナル伝達は細胞質内の ITSM モチーフによって担われ、SAP/SH2D1A や EAT-2 などのアダプタータンパク質をリクルートし、下流のリン酸化ネットワークを形成することで、活性化シグナルと抑制シグナルのバランスを調整します。これらの経路を通じて、CD244 は免疫シナプス形成、標的細胞の認識、炎症応答の制御に寄与します。CD244 シグナルの変調は、抗ウイルス・抗腫瘍免疫の破綻、NK 細胞の機能疲弊、慢性炎症や造血器腫瘍モデルにおける免疫バランス異常と関連づけられています。

NK 2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd244遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd244内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd244のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NK 2B4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NK 2B4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd244欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NK 2B4の機能に不可欠なCd244エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd244ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NK 2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNK 2B4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd244遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NK 2B4 HDRプラスミド（m）および NK 2B4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd244ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd244標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。