NFRκB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433432
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NFRκB El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NFRκB, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NFRκB Anticuerpo (A-12): sc-514977
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NFRκB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433432 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Nfrkb de ratón codifica NFRκB, un factor nuclear asociado con la cromatina relacionada con NF-κB y con la regulación transcripcional, que puede influir en programas de expresión génica sensibles a estímulos. NFRκB se ha vinculado a complejos proteicos nucleares implicados en procesos dependientes del ADN, incluido el control de la transcripción y el mantenimiento de la estabilidad del genoma. Al modular la expresión específica del contexto de genes inflamatorios y de respuesta al estrés, Nfrkb puede moldear vías que gobiernan la proliferación, la diferenciación y la supervivencia celular. La desregulación de redes reguladoras adyacentes a NF-κB se estudia con frecuencia en la disfunción inmunitaria, fenotipos inflamatorios y estados transcripcionales relevantes para el cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NFRκB (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nfrkb en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nfrkb junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nfrkb tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NFRκB.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nfrkb para la investigación de la señalización de NFRκB, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Nfrkb críticos para la función de NFRκB
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nfrkb para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NFRκB CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NFRκB CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nfrkb. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NFRκB (m) y el plásmido HDR NFRκB (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nfrkb para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nfrkb definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.