Plásmido Doble Nickase (h) NF90: sc-402626-NIC

ILF3 codifica NF90, una proteína de unión a ARN de doble cadena que participa en la regulación génica postranscripcional al modular la estabilidad del ARNm, el *splicing*, la exportación nuclear y la traducción, a menudo en conjunto con NF45 y otros socios ribonucleoproteicos. NF90 participa en respuestas antivirales innatas y en programas adaptativos al estrés al influir en transcritos relacionados con interferón y en vías del metabolismo del ARN, y también puede afectar el control del ciclo celular mediante la regulación selectiva de ARNm asociados al crecimiento. A través de sus interacciones con la maquinaria de transcripción y de procesamiento de ARN, NF90 ayuda a coordinar programas de expresión génica vinculados con la proliferación, la diferenciación y la señalización de estrés celular. La desregulación de ILF3/NF90 se ha asociado con alteraciones de la homeostasis del ARN en contextos relevantes para la biología tumoral y fenotipos inflamatorios, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la regulación impulsada por ARN.

NF90 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ILF3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ILF3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ILF3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ILF3 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.