Neurogenin 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419233

Descripción general

Neurog2 codifica el factor de transcripción de tipo hélice-bucle-hélice básico (bHLH) Neurogenina 2, un regulador maestro del compromiso con el linaje neuronal durante el desarrollo embrionario del ratón. Neurogenina 2 impulsa programas de expresión génica proneural y coordina la salida del ciclo celular, la diferenciación neuronal y la migración mediante redes transcripcionales que se interconectan con la señalización de Notch y con factores bHLH aguas abajo. Es fundamental para la especificación de múltiples subtipos neuronales en el desarrollo de los sistemas nerviosos central y periférico, así como para el control temporal de la neurogénesis. La desregulación de programas dependientes de NEUROG2 se ha implicado en fenotipos del neurodesarrollo y en estados alterados de diferenciación neuronal relevantes para el modelado de trastornos del desarrollo cerebral.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Neurog2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Neurog2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Neurog2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Neurogenin 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Neurog2 para la investigación de la señalización de Neurogenin 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Neurog2 críticos para la función de Neurogenin 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Neurog2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Neurog2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Neurogenin 2 (m) y el plásmido HDR Neurogenin 2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Neurog2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Neurog2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.