neurexin I CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401872

Übersicht

NRXN1 kodiert Neurexin I, ein präsynaptisches Zelladhäsionsmolekül, das die Bildung und Reifung von Synapsen organisiert, indem es mit postsynaptischen Partnern wie Neuroliginen und LRRTMs interagiert. Durch alternatives Spleißen und die Vielfalt an Isoformen prägt Neurexin I das Gleichgewicht zwischen exzitatorischen und inhibitorischen Synapsen, reguliert die Wahrscheinlichkeit der Neurotransmitterfreisetzung und unterstützt transsynaptische Signalübertragung, die für die Konnektivität neuronaler Netzwerke wichtig ist. Die Funktion von NRXN1 überschneidet sich mit Signalwegen, die den synaptischen Vesikelzyklus, die calciumabhängige Exozytose und die aktivitätsabhängige synaptische Plastizität steuern. Genetische Störungen oder Kopienzahlvariationen von NRXN1 wurden mit neuroentwicklungsbedingten und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was NRXN1 zu einem zentralen Locus für mechanistische Studien in neuronalen Systemen macht.

Das neurexin I CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NRXN1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NRXN1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NRXN1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die neurexin I-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NRXN1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der neurexin I-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NRXN1-Exone abzielen, die für die neurexin I-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NRXN1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom neurexin I CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom neurexin I CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NRXN1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das neurexin I HDR-Plasmid (h) und neurexin I HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NRXN1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NRXN1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.