NDRG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421841
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NDRG1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NDRG1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NDRG1 Anticuerpo (B-5): sc-398291
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NDRG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421841 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Ndrg1 codifica NDRG1, una proteína citoplasmática inducida por el estrés celular y por señales de diferenciación, que contribuye a la regulación del crecimiento celular, el compromiso de linaje y las respuestas a la hipoxia. En células de ratón, NDRG1 se ha vinculado a vías que controlan la homeostasis del hierro, el tráfico vesicular y la organización del citoesqueleto, con efectos dependientes del contexto sobre programas de proliferación y motilidad. NDRG1 también se asocia con la biología de la mielina en el sistema nervioso periférico y se ha estudiado en modelos de neurodegeneración y neuropatías desmielinizantes. Además, la expresión alterada de Ndrg1 se ha investigado en biología tumoral y en fenotipos relacionados con la metástasis, lo que respalda su relevancia en estudios de señalización y adaptación al estrés.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NDRG1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ndrg1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ndrg1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ndrg1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NDRG1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ndrg1 para la investigación de la señalización de NDRG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ndrg1 críticos para la función de NDRG1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ndrg1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NDRG1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NDRG1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ndrg1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NDRG1 (m) y el plásmido HDR NDRG1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ndrg1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ndrg1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.