NALP10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406528

Descripción general

NLRP10 (NALP10) es un miembro de la familia de receptores tipo NOD implicado en la regulación de la señalización inmunitaria innata y de la homeostasis inflamatoria. A diferencia de los NLR canónicos que forman inflamasomas, NLRP10 se ha relacionado con la modulación de la transcripción dependiente de NF-κB, las respuestas de citocinas y el control de resultados asociados al inflamasoma de manera dependiente del contexto. Contribuye a la función de las células presentadoras de antígeno, incluidos efectos sobre la migración de células dendríticas y el cebado (priming) de células T, situando a NLRP10 dentro de vías que moldean la activación y la tolerancia inmunitarias. La alteración de la actividad de NLRP10 se ha asociado con desregulación inmunitaria y fenotipos inflamatorios, lo que respalda su uso como diana en estudios mecanísticos en inmunología y en modelos de respuesta del huésped.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NALP10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NLRP10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NLRP10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NLRP10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NALP10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NLRP10 para la investigación de la señalización de NALP10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NLRP10 críticos para la función de NALP10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NLRP10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NALP10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NALP10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NLRP10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NALP10 (h) y el plásmido HDR NALP10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NLRP10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NLRP10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.