Plasmide CRISPR/Cas9 KO NAIP (h): sc-418189

Présentation

NAIP (NLR family apoptosis inhibitory protein) est un récepteur cytosolique humain de type NOD (NOD-like receptor) qui contribue à la détection innée des signaux immunitaires et à la régulation de la survie cellulaire. Il participe à des processus liés à l’inflammasome en reconnaissant des ligands bactériens spécifiques et en favorisant l’activation de voies de caspases inflammatoires, influençant la maturation des cytokines de la famille IL‑1 et les réponses pyroptotiques. Par ces fonctions, NAIP interfère avec la signalisation NF‑κB, les mécanismes de défense hôte–pathogène et les réponses au stress cellulaire qui façonnent l’homéostasie inflammatoire. Une expression ou une fonction dérégulée de NAIP a été associée à une altération de la signalisation inflammatoire lors d’infections et de pathologies à médiation immunitaire, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de l’inflammation et de la mort cellulaire.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO NAIP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène NAIP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du NAIP, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert NAIP à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine NAIP.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en NAIP pour l'étude de la signalisation de NAIP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de NAIP essentiels à la fonction de NAIP
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de NAIP pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le NAIP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le NAIP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus NAIP. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le NAIP plasmide HDR (h) et le NAIP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie NAIP pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles NAIP définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.