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MUS81双切口酶质粒(h) | sc-402664-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MUS81双切口酶质粒(h2) | sc-402664-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUS81 编码一种结构特异性内切核酸酶,可与 EME1/EME2 形成异源二聚体,用于解离停滞的复制叉以及诸如类 Holliday 连接结构等重组中间体。它在 DNA 损伤应答与复制压力通路中发挥作用,并与同源重组和检查点信号协同,以维持基因组稳定性。MUS81 的活性有助于保证染色体分离的准确性,并限制 S 期有毒 DNA 中间体的积累。MUS81 依赖的加工过程一旦失调,已被发现与基因组不稳定性升高以及在肿瘤相关背景下对复制压力敏感性改变有关,因此常被作为 DNA 修复机制研究中的重要靶点。
MUS81 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MUS81 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MUS81内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MUS81的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MUS81基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。