Msx-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405732

Übersicht

MSX1 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor Msx-1, einen Regulator der embryonalen Musterbildung und der Festlegung von Zelllinien, der dabei hilft, epithel–mesenchymale Interaktionen während der kraniofazialen, der Extremitäten- und der odontogenen Entwicklung zu koordinieren. Msx-1 integriert entwicklungsbiologische Signalinputs, darunter BMP- und WNT-assoziierte Transkriptionsprogramme, um Proliferation, Differenzierung und Apoptose in Vorläuferzellpopulationen zu modulieren. Eine fehlregulierte MSX1-Expression oder Loss-of-Function-Varianten wurden mit angeborenen Fehlbildungen der Kraniofazial- und Zahnentwicklung in Verbindung gebracht, was seine Rolle in der Morphogenese und Gewebespezifizierung widerspiegelt. Im adulten Kontext wird eine veränderte MSX1-Aktivität außerdem hinsichtlich ihres Einflusses auf zelluläre Plastizität und den Differenzierungszustand in Modellen der Entwicklungs- und Krebsbiologie untersucht.

Das Msx-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MSX1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MSX1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MSX1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Msx-1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MSX1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Msx-1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MSX1-Exone abzielen, die für die Msx-1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MSX1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Msx-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Msx-1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MSX1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Msx-1 HDR-Plasmid (h) und Msx-1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MSX1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MSX1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.