Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
MRE11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401510
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MRE11 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MRE11, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MRE11 Anticuerpo (18): sc-135992
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MRE11 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401510 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MRE11 codifica una nucleasa que forma el complejo MRN con RAD50 y NBN para detectar roturas de doble cadena del ADN y coordinar la señalización del punto de control dependiente de ATM. Mediante actividades exonucleasa 3′–5′ y endonucleasa, MRE11 promueve la resección de los extremos del ADN, lo que encauza la reparación hacia la recombinación homóloga, y estabiliza las horquillas de replicación detenidas durante el estrés replicativo. Esta función de mantenimiento del genoma vincula a MRE11 con la homeostasis de los telómeros, la recombinación meiótica y la supresión de reordenamientos cromosómicos. La desregulación de la función del complejo MRN se asocia con fenotipos de inestabilidad genómica y se ha estudiado en el contexto de la biología del cáncer y de trastornos hereditarios de reparación del ADN.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MRE11 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MRE11 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MRE11 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MRE11 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MRE11.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MRE11 para la investigación de la señalización de MRE11, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MRE11 críticos para la función de MRE11
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MRE11 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MRE11 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MRE11 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MRE11. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MRE11 (h) y el plásmido HDR MRE11 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MRE11 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MRE11 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.