Date published: 2026-7-20

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MLTK CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-437372

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データシート
  • 対象生物種: mouse
  • 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、~20回トランスフェクション
  • MLTK CRISPR/Cas9 ノックアウト(KO)プラスミド(m)は、GeCKO v2ライブラリ由来の配列を用いて最大のノックアウト効率を実現するよう設計された、Cas9ヌクレアーゼおよび標的特異的な20塩基対のガイドRNA(gRNA)をそれぞれコードするプラスミドのプールです
  • gRNA配列は、Cas9を誘導してMLTKゲノム座において部位特異的な二本鎖切断(DSBs)を引き起こし、非相同末端結合(NHEJ)を介して遺伝子ノックアウトをもたらします
  • ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子はLoxP部位で挟まれているため、安定したノックアウト細胞株を樹立した後、Creリコンビナーゼ(Creベクター:sc-418923)を用いて選択マーカーを除去することができる。
  • トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: MLTK 抗体 (A-2): sc-390924
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    注文情報

    製品名カタログ #単位価格数量お気に入り

    MLTK CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m)

    sc-437372
    20 µg
    $397.00

    概要

    Map3k20 は、混合系譜キナーゼ様タンパク質(MLTK)をコードしており、MLTK はセリン/スレオニン型の MAP3K として、上流のストレス刺激や炎症性シグナルを JNK および p38 経路を含む MAPK シグナル伝達カスケードへと結び付けます。MLTK は下流の MAP2K をリン酸化することで、アポトーシス、細胞骨格の再編成、環境ストレスへの細胞適応を制御する転写プログラムの調節に寄与します。マウス系では、Map3k20 の活性は遺伝毒性ストレスや酸化ストレスに対する細胞運命決定と関連し、自然免疫や組織恒常性の経路と交差するシグナル伝達ノードに影響を与え得ることが示されています。MLTK のような MAP3K を含む MAPK 経路の配線異常(シグナルネットワークの乱れ)は、神経変性、炎症性病態、がん関連ストレスシグナルのモデル全般に広く関わるため、Map3k20 は機構解明のための有用な標的となります。

    MLTK CRISPR/Cas9 KOプラスミド(m)は、mouse細胞株におけるMap3k20遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Map3k20内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA(sgRNA)と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

    このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Map3k20のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失(インデル)が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合(NHEJ)経路を通じて修復され、その結果、MLTKタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

    このCRISPRノックアウトシステムにより、MLTKシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Map3k20欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

    主な特徴

    • MLTKの機能に不可欠なMap3k20エクソンを標的とするsgRNA
      導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
      トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
      ノックアウト効率を向上させるための、Map3k20ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
      トランスフェクションによる導入に対応

    設計バリエーション

    CRISPRs +/- HDR

    • MLTK CRISPR/Cas9 KOプラスミド(m)およびMLTK CRISPR/Cas9 KOプラスミド(m2)によってコードされるgRNAは、Map3k20遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
      MLTK HDRプラスミド(m)および MLTK HDRプラスミド(m2)によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMap3k20ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMap3k20標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

    研究用のみ。診断用または治療用ではありません。