MIP-1γ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422849
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MIP-1γ El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MIP-1γ, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MIP-1γ Anticuerpo (X-18): sc-74228
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MIP-1γ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422849 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Ccl9 codifica la quimiocina CC MIP-1γ, un mediador secretado que dirige el tráfico de células inmunitarias innatas al promover la quimiotaxis y la activación de poblaciones mieloides como monocitos y macrófagos. La señalización de MIP-1γ contribuye a redes de citocinas inflamatorias y a programas de reclutamiento de leucocitos que se entrecruzan con respuestas impulsadas por NF-κB y con cascadas más amplias de señalización de receptores de quimiocinas. En tejidos de ratón, la expresión de Ccl9 se asocia comúnmente con estados de activación inmunitaria y con la remodelación del microambiente, lo que respalda estudios sobre inflamación, defensa del hospedador y comunicación entre células inmunitarias. Los gradientes de quimiocinas desregulados que involucran a MIP-1γ son relevantes en modelos de enfermedad inflamatoria crónica, infección e inflamación asociada a tumores, donde la infiltración mieloide influye en la patología.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MIP-1γ (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ccl9 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ccl9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ccl9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MIP-1γ.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ccl9 para la investigación de la señalización de MIP-1γ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ccl9 críticos para la función de MIP-1γ
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ccl9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MIP-1γ CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MIP-1γ CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ccl9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MIP-1γ (m) y el plásmido HDR MIP-1γ (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ccl9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ccl9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.