MGAT1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-414091

Übersicht

Das humane Gen **MOGAT1** kodiert die Monoacylglycerol-O-Acyltransferase 1 (MGAT1), ein Enzym der Membran des endoplasmatischen Retikulums, das die Acylierung von Monoacylglycerol zur Bildung von Diacylglycerol katalysiert – einem zentralen Zwischenprodukt der Triacylglycerol-Biosynthese. Durch die Steuerung des Gleichgewichts von Monoacylglycerol, Diacylglycerol und nachgeschalteten Lipidpools trägt MGAT1 zur Bildung von Lipidtröpfchen und zur allgemeinen zellulären Lipidhomöostase bei. Eine veränderte MGAT1-Aktivität wurde mit metabolischen Phänotypen in Verbindung gebracht, darunter eine gestörte hepatische Lipidakkumulation und Insulinsignalisierung, und wird im Kontext adipositasassoziierter Steatose sowie damit verbundener entzündlicher Stresssignalwege untersucht. Diese Funktionen machen MOGAT1 zu einem relevanten Ziel für die Untersuchung der Umprogrammierung des Lipidstoffwechsels und der organspezifischen Regulation der Speicherung neutraler Lipide.

Das MGAT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MOGAT1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MOGAT1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MOGAT1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MGAT1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MOGAT1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MGAT1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MOGAT1-Exone abzielen, die für die MGAT1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MOGAT1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MGAT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MGAT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MOGAT1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MGAT1 HDR-Plasmid (h) und MGAT1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MOGAT1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MOGAT1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.