Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MaxiKβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403096
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MaxiKβ El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MaxiKβ, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MaxiKβ Anticuerpo (A-5): sc-377023
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MaxiKβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403096 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KCNMB1 codifica la subunidad reguladora β1 de los canales de potasio de gran conductancia (BK/MaxiK) activados por Ca²⁺ y por voltaje, conocida comúnmente como MaxiKβ. Al aumentar la sensibilidad de los canales BK al Ca²⁺ y modificar la cinética de apertura y cierre, MaxiKβ modula la excitabilidad de la membrana, la dinámica intracelular de Ca²⁺ y el tono del músculo liso. Esta actividad moduladora se integra en vías que controlan la reactividad vascular, la contractilidad de las vías aéreas y el manejo renal de electrolitos, con efectos posteriores sobre la señalización vinculada a NO/cGMP y procesos dependientes de Ca²⁺. Alteraciones en la función o la expresión de KCNMB1 se han asociado con un control anómalo de la presión arterial, fenotipos de hipercontractilidad del músculo liso y trastornos más amplios relacionados con la excitabilidad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MaxiKβ (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KCNMB1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KCNMB1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KCNMB1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MaxiKβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KCNMB1 para la investigación de la señalización de MaxiKβ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KCNMB1 críticos para la función de MaxiKβ
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KCNMB1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MaxiKβ CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MaxiKβ CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KCNMB1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MaxiKβ (h) y el plásmido HDR MaxiKβ (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KCNMB1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KCNMB1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.