MALL Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406302

Descripción general

MALL (se pronuncia “mall”) codifica una proteína de membrana tetraspan enriquecida en microdominios de membrana ricos en colesterol y esfingolípidos, donde ayuda a organizar el tráfico apical y la compartimentación de la membrana en células epiteliales. A través de sus efectos sobre la arquitectura de las balsas lipídicas, MALL puede influir en el reciclaje endocítico, el transporte vesicular y la distribución espacial de complejos de señalización en la membrana plasmática. Se ha observado una expresión alterada de MALL en múltiples tipos de tumores y se estudia en relación con el estado de diferenciación epitelial, la polaridad celular y el comportamiento de señalización dependiente de microdominios. Estas propiedades hacen que MALL sea relevante para investigar mecanismos de organización de membrana que modulan la proliferación, la adhesión y la dinámica de los receptores en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MALL (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MALL en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MALL junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MALL tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MALL.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MALL para la investigación de la señalización de MALL, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MALL críticos para la función de MALL
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MALL para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MALL CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MALL CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MALL. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MALL (h) y el plásmido HDR MALL (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MALL para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MALL definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.