LSDP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426297

概要

ペリリピン5（Plin5、別名リピッドストレージ・ドロップレット・プロテイン5：LSDP5）は、脂質滴（リピッドドロップレット）に結合するタンパク質で、細胞内トリアシルグリセロールの貯蔵を調節し、β酸化のための脂肪酸輸送をミトコンドリアへと協調的に導きます。心臓、肝臓、骨格筋などのマウスの酸化的組織において、PLIN5は脂質滴表面へのリパーゼのアクセスを制御し、脂質動員をミトコンドリアの酸化能と連動させることで、脂質の隔離（貯蔵）とリポリシスのバランス維持に寄与します。これらの作用を通じて、PLIN5はエネルギー恒常性、脂質によるシグナル伝達、ならびに栄養状態や絶食に対する細胞応答に影響を与えます。PLIN5に関連する脂質滴ダイナミクスの破綻は、ミトコンドリア機能や炎症関連の代謝表現型に影響する脂肪肝、インスリン抵抗性、脂質毒性ストレスの実験モデルと関連しています。

LSDP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPlin5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Plin5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Plin5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LSDP5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LSDP5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Plin5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LSDP5の機能に不可欠なPlin5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Plin5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LSDP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびLSDP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Plin5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LSDP5 HDRプラスミド（m）および LSDP5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPlin5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPlin5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。