LRRN1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421471

Descripción general

La repetición rica en leucina neuronal 1 (LRRN1; Lrrn1) codifica una proteína de membrana de paso único enriquecida en tejidos neurales e implicada en interacciones célula–célula y en procesos asociados a neuritas. A través de sus dominios extracelulares con repeticiones ricas en leucina, se considera que LRRN1 influye en la señalización dependiente de la adhesión, la diferenciación neuronal y el patrón tisular durante el desarrollo, con vínculos a vías que regulan la organización de membrana y programas sinápticos o de guía axonal. Se han reportado alteraciones en la expresión de LRRN1 en múltiples conjuntos de datos transcriptómicos relacionados con cáncer, lo que respalda investigar sus contribuciones a estados de proliferación, migración y diferenciación sin implicar utilidad clínica. En sistemas de ratón, la perturbación de Lrrn1 ofrece un modelo abordable para examinar cómo LRRN1 moldea fenotipos del desarrollo y salidas de señalización en neuronas y otros tipos celulares que expresan LRRN1.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LRRN1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lrrn1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lrrn1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lrrn1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LRRN1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lrrn1 para la investigación de la señalización de LRRN1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Lrrn1 críticos para la función de LRRN1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lrrn1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LRRN1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LRRN1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lrrn1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LRRN1 (m) y el plásmido HDR LRRN1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lrrn1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lrrn1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.