非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Leukocyte-type 12-LO双切口酶质粒(m): sc-419089-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Leukocyte-type 12-LO 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Leukocyte-type 12-LO双切酶质粒（m）和Leukocyte-type 12-LO双切酶质粒（m2）编码针对Alox15的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：15-LO: sc-133085，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Leukocyte-type 12-LO双切口酶质粒(m) | sc-419089-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Leukocyte-type 12-LO双切口酶质粒(m2) | sc-419089-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Alox15 编码白细胞型 12-脂氧合酶（12-LO）。该酶是一种非血红素铁依赖的双加氧酶，可对花生四烯酸等多不饱和脂肪酸进行加氧反应，生成包括 12-HETE 及相关氧脂素（oxylipins）在内的生物活性脂质介质。这些产物参与氧化还原敏感信号传导、炎症反应调控、白细胞趋化以及脂质重塑，使 Alox15 活性与二十碳烷酸类（eicosanoid）代谢及炎症消退程序相联系。在免疫细胞和血管细胞的背景下，12-LO 来源的代谢物可影响细胞因子信号、氧化应激以及细胞命运决定，从而塑造组织炎症。因此，在炎症、动脉粥样硬化、代谢功能障碍以及免疫介导的组织损伤等模型中，Alox15 被广泛研究，因为脂质介质的平衡是决定表型的关键因素。
Leukocyte-type 12-LO 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Alox15 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Alox15内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Alox15的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Alox15基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。