LBX1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406846

Descripción general

LBX1 (ladybird homeobox 1) codifica un factor de transcripción homeobox que regula el patrón embrionario y la especificación de linajes, con funciones destacadas en la diferenciación de interneuronas de la médula espinal y en la migración de precursores del músculo esquelético. Mediante la unión al ADN de manera específica de secuencia, LBX1 ayuda a coordinar programas de transcripción que moldean el desarrollo dorsoventral del tubo neural y las vías miogénicas durante la somitogénesis. La variación genética y la regulación alterada de LBX1 se han asociado con fenotipos del desarrollo, incluida la susceptibilidad a la escoliosis idiopática del adolescente, lo que resalta su relevancia para la investigación musculoesquelética y del neurodesarrollo. En modelos celulares, LBX1 se estudia comúnmente por su impacto en el estado de diferenciación, el mantenimiento de la identidad celular y las redes transcripcionales aguas abajo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LBX1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LBX1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LBX1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LBX1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LBX1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LBX1 para la investigación de la señalización de LBX1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de LBX1 críticos para la función de LBX1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LBX1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LBX1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LBX1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LBX1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LBX1 (h) y el plásmido HDR LBX1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LBX1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LBX1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.