LARP4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414019

Descripción general

El miembro 4 de la familia de dominios de ribonucleoproteínas La (LARP4) es una proteína de unión a ARN que se asocia con la proteína de unión a poli(A) y regula la estabilidad del ARNm y la eficiencia de traducción en el citoplasma. Mediante interacciones con complejos mRNP y con la maquinaria de traducción, LARP4 influye en la regulación génica postranscripcional, afectando la producción de proteínas y la adaptación celular a señales de crecimiento y estrés. Estas funciones vinculan a LARP4 con vías que controlan la proliferación celular, la migración y la dinámica del citoesqueleto a través de cambios aguas abajo en el destino de los transcritos y en el control translacional. La desregulación del metabolismo del ARN y de la traducción es una característica recurrente en múltiples cánceres y en contextos del neurodesarrollo, lo que convierte a LARP4 en un nodo útil para estudios mecanísticos de programas de expresión génica relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LARP4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LARP4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LARP4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LARP4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LARP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LARP4 para la investigación de la señalización de LARP4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de LARP4 críticos para la función de LARP4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LARP4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LARP4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LARP4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LARP4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LARP4 (h) y el plásmido HDR LARP4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LARP4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LARP4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.