KIFC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405597

Descripción general

KIFC1 codifica una proteína motora de la familia kinesina-14 con dominio C-terminal que se desplaza hacia los extremos menos de los microtúbulos y contribuye a la organización del huso mitótico, el agrupamiento de centrosomas y la segregación fiel de los cromosomas. Al regular la dinámica de los microtúbulos y la integridad de los polos del huso, KIFC1 se vincula con el control del ciclo celular y con las respuestas al estrés mitótico que determinan la capacidad proliferativa y la estabilidad del genoma. La actividad desregulada de KIFC1 se ha asociado con mitosis aberrantes, aneuploidía y una supervivencia alterada de células que presentan amplificación de centrosomas. Estas características hacen de KIFC1 un nodo útil para estudiar mecanismos de ensamblaje del huso, inestabilidad cromosómica y transporte basado en microtúbulos en células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KIFC1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KIFC1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KIFC1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KIFC1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KIFC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KIFC1 para la investigación de la señalización de KIFC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KIFC1 críticos para la función de KIFC1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KIFC1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KIFC1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KIFC1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KIFC1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KIFC1 (h) y el plásmido HDR KIFC1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KIFC1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KIFC1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.