Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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JAK3 Plasmide Double Nickase (h): sc-400835-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JAK3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JAK3 Double Nickase Plasmid (h) e il JAK3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira JAK3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: JAK3 Antibody (B-12): sc-6932
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JAK3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400835-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JAK3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400835-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La Janus chinasi 3 (JAK3) è una tirosina chinasi non recettoriale espressa prevalentemente nelle linee ematopoietiche, che collega la segnalazione dei recettori per le citochine a programmi trascrizionali a valle. Associandosi alla catena γ comune (IL2RG) dei recettori per IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21, JAK3 fosforila le subunità recettoriali e attiva i fattori STAT per coordinare sviluppo, proliferazione e differenziazione dei linfociti. Questa via si interseca con reti più ampie di regolazione immunitaria, incluse le vie di segnalazione PI3K–AKT e MAPK, modulando funzione effettrice e omeostasi. Una segnalazione JAK3 deregolata e variazioni genetiche sono associate a fenotipi di immunodeficienza e ad attivazione immunitaria aberrante, rendendo JAK3 un nodo chiave per studi meccanicistici in immunologia e infiammazione.
JAK3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JAK3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JAK3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JAK3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JAK3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.