Inhibin β-C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421132

Übersicht

Inhbc kodiert die Inhibin-β-C-Untereinheit der Maus, ein Mitglied der TGF-β-Superfamilie, das zur Bildung von Activin- und Inhibin-Liganden beitragen kann und dadurch die SMAD-abhängige Signalübertragung beeinflusst. Über die Modulation der Aktivität des TGF-β/Activin-Signalwegs wird Inhibin β-C mit der Regulation zellulärer Differenzierungsprogramme, der Gewebehomöostase und der kontextabhängigen Kontrolle der Proliferation in Verbindung gebracht. Ein verändertes Gleichgewicht der Activin-/Inhibin-Signale ist mit fehlregulierten entzündlichen und fibrotischen Reaktionen assoziiert und wurde in mehreren Modellsystemen mit Veränderungen reproduktions- und endokrinbezogener Prozesse verknüpft. In der Mausforschung stellt Inhbc einen gut untersuchbaren Ansatzpunkt dar, um Ligandenverfügbarkeit und nachgeschaltete transkriptionelle Antworten innerhalb von Netzwerken der TGF-β-Superfamilie zu analysieren.

Das Inhibin β-C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Inhbc-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Inhbc-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Inhbc nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Inhibin β-C-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Inhbc-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Inhibin β-C-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Inhbc-Exone abzielen, die für die Inhibin β-C-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Inhbc-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Inhibin β-C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Inhibin β-C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Inhbc-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Inhibin β-C HDR-Plasmid (m) und Inhibin β-C HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Inhbc-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Inhbc-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.