Plásmido Doble Nickase (h) Inhibin β-B: sc-402060-NIC

INHBB codifica la subunidad beta B de la inhibina, que puede homodimerizar para formar activina B o heterodimerizar con otras subunidades de la superfamilia TGF-β para modular la señalización a través de programas transcripcionales dependientes de SMAD2/3. El equilibrio activina/inhibina influye en la retroalimentación endocrina, la función de los tejidos reproductivos y el control más amplio de la proliferación y diferenciación celular, la inflamación y la remodelación de la matriz extracelular. La señalización de activina impulsada por INHBB se interseca con vías que regulan el desarrollo gonadal y la función hipofisaria, y la literatura ha vinculado la expresión alterada con un control del crecimiento desregulado y la remodelación tisular en contextos que incluyen trastornos reproductivos y fenotipos asociados al cáncer. Estas propiedades hacen de INHBB una diana útil para estudios mecanísticos de la dinámica de señalización de la familia TGF-β y de respuestas transcripcionales específicas del contexto.

Inhibin β-B El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus INHBB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de INHBB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de INHBB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con INHBB alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.