Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IMP-1/IGF2BP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431212
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IMP-1/IGF2BP1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IMP-1/IGF2BP1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IMP-1/IGF2BP1 Anticuerpo (D-9): sc-166344
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IMP-1/IGF2BP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-431212 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Igf2bp1 codifica la proteína de unión a ARN IMP-1/IGF2BP1, un regulador posranscripcional que reconoce ARNm diana mediante dominios KH y modula su localización, estabilidad y traducción. En células de ratón, IGF2BP1 ayuda a coordinar programas vinculados al crecimiento y la diferenciación al determinar el destino del ARNm dentro de gránulos ribonucleoproteicos y de vías de transporte asociadas al citoesqueleto. Su red reguladora se cruza con ejes de señalización proliferativos y del desarrollo, y se estudia con frecuencia por sus efectos en transiciones de estado celular, la localización de ARN asociada a la migración y el control de la traducción. La desregulación de programas de ARN asociados a IGF2BP1 se ha implicado en fenotipos oncogénicos y en una homeostasis tisular alterada, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la regulación de la expresión génica en modelos pertinentes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IMP-1/IGF2BP1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Igf2bp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Igf2bp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Igf2bp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IMP-1/IGF2BP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Igf2bp1 para la investigación de la señalización de IMP-1/IGF2BP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Igf2bp1 críticos para la función de IMP-1/IGF2BP1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Igf2bp1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Igf2bp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IMP-1/IGF2BP1 (m) y el plásmido HDR IMP-1/IGF2BP1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Igf2bp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Igf2bp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.