IL-3Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421109

概要

Il3ra は、インターロイキン3受容体のα鎖（IL-3Rα、CD123）をコードしており、リガンド結合の特異性を担うとともに、共通β鎖とシグナル伝達複合体を形成して IL-3 依存的なシグナルを細胞内へ伝達します。マウスの造血系および免疫細胞において、IL-3Rα は増殖・生存・分化を調節し、下流の JAK/STAT、PI3K/AKT、MAPK 経路を介して骨髄系系列の応答を形作ります。IL-3Rα シグナル伝達の変調は、サイトカインにより駆動される恒常性や炎症プログラムを乱し得るため、Il3ra は造血、骨髄系の活性化状態、ならびにサイトカイン受容体間クロストークを研究するうえで有用な標的となります。また本受容体は、造血系コンパートメント全体にわたる発生および機能的多様性を解析するための免疫表現型解析マーカーとしても広く用いられています。

IL-3Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl3ra遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il3ra内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il3raのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-3Rαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-3Rαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il3ra欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-3Rαの機能に不可欠なIl3raエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il3raゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-3Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-3Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il3ra遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-3Rα HDRプラスミド（m）および IL-3Rα HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl3raホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl3ra標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。