IFN-α6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421043

Descripción general

Ifna6 de ratón codifica el interferón alfa-6 (IFN-α6), un interferón de tipo I que inicia programas antivirales e inmunomoduladores en respuesta a señales asociadas a patógenos y a daño. El IFN-α6 se une a IFNAR para activar la señalización JAK–STAT, induciendo genes estimulados por interferón que regulan la defensa inmunitaria innata, la presentación de antígenos y las redes de citocinas. Esta vía determina resultados celulares como el control de la proliferación y la apoptosis, y se interseca con la señalización de receptores de reconocimiento de patrones, incluidas las vías de RIG-I/MDA5 y de TLR. La desregulación de la señalización de interferón de tipo I se asocia con susceptibilidad a infecciones virales y con fenotipos crónicos inflamatorios y similares a autoinmunidad, lo que hace a Ifna6 relevante para estudios mecanísticos de la patología impulsada por interferón.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFN-α6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifna6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifna6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifna6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFN-α6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifna6 para la investigación de la señalización de IFN-α6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ifna6 críticos para la función de IFN-α6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifna6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IFN-α6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFN-α6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifna6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFN-α6 (m) y el plásmido HDR IFN-α6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifna6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifna6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.