IFIT3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403557-NIC

A proteína induzida por interferon com repetições tetratricopeptídicas 3 (IFIT3) é o produto de um gene estimulado por interferon que participa da defesa antiviral inata, a jusante da sinalização de interferons tipo I/III e de receptores de reconhecimento de padrões. A IFIT3 forma complexos com outros membros da família IFIT e modula a detecção de RNA, o controle da tradução e a amplificação das respostas de interferon mediadas por JAK–STAT, influenciando a expressão de programas efetores antivirais mais amplos. Por meio dessas atividades, a IFIT3 contribui para a restrição celular da replicação viral e molda redes de sinalização inflamatória, como a via NF-κB e a transcrição dependente de IRF. A expressão desregulada de IFIT3 tem sido associada a alterações na responsividade antiviral e a estados inflamatórios, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos em biologia de infecções, imunologia e sinalização de interferon relacionada ao câncer.

IFIT3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IFIT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IFIT3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IFIT3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IFIT3 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.