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IDE双切口酶质粒(h) | sc-401900-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IDE双切口酶质粒(h2) | sc-401900-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人IDE(胰岛素降解酶)是一种锌依赖性金属蛋白酶,能够切割胰岛素及其他具有生物活性的肽,从而促进细胞质、内体和过氧化物酶体等区室中的肽类激素周转与蛋白稳态维持。IDE活性会影响胰岛素信号传导的动态变化,并与调控葡萄糖稳态和细胞应激反应的通路发生交叉。IDE的表达或功能改变与胰岛素清除失调有关,并在代谢性疾病生物学以及与神经退行性机制相关的肽聚集过程研究中受到关注。这些特性使IDE成为研究蛋白水解调控如何塑造内分泌信号、肽降解代谢与细胞稳态的有用靶点。
IDE 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IDE 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IDE内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IDE的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IDE基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。