HSF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-400432-KO-2

概要

熱ショック因子1（HSF1）は、HSP70およびHSP90ファミリーを含むシャペロンやプロテオスタシス関連遺伝子の発現を誘導することで、タンパク質の折りたたみを維持し、タンパク質毒性ストレスを抑制する細胞性熱ショック応答を統括するマスター転写制御因子である。急性ストレスへの適応にとどまらず、HSF1はプロテアソーム機能、翻訳、代謝状態からのシグナルを統合し、タンパク質品質管理、細胞骨格の組織化、細胞生存プログラムに影響を与える。HSF1の活性は、HSP90依存的なクライアントタンパク質の安定化、オートファジー、ストレス顆粒の動態といった経路とも交差し、細胞が環境性および細胞内のストレッサーにどう応答するかを形作っている。HSF1シグナルの破綻は、悪性転換や腫瘍の維持に加え、神経変性疾患やその他のタンパク質ミスフォールディング関連疾患にも関与するとされており、機序解明研究で広く用いられる重要な結節点となっている。

HSF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるHSF1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HSF1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HSF1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HSF1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HSF1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HSF1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HSF1の機能に不可欠なHSF1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HSF1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HSF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHSF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HSF1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HSF1 HDRプラスミド（h）および HSF1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHSF1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHSF1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。