HIVEP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421334

Übersicht

Hivep3 kodiert HIVEP3, einen großen Zinkfinger-Transkriptionsfaktor, der an κB-ähnliche DNA-Elemente bindet und stimulusabhängige Genexpressionsprogramme moduliert. HIVEP3 steht mit der Regulation immunologischer und entzündlicher Signalnetzwerke in Verbindung, einschließlich transkriptioneller Outputs nachgeschaltet von NF-κB und verwandten Signalwegen, die die Zytokinproduktion, die Aktivierung von Lymphozyten und zelluläre Stressantworten koordinieren. In Mausmodellen wurde eine veränderte HIVEP3-Aktivität mit einer gestörten Immunhomöostase und entzündlichen Phänotypen in Zusammenhang gebracht, was seine Relevanz für mechanistische Studien zu Autoimmunität und Gewebeentzündungen unterstreicht. Da Hivep3 sequenzspezifische DNA-Bindung mit einer breiten transkriptionellen Kontrolle verknüpft, wird es zudem als Knotenpunkt zur Untersuchung genregulatorischer Schaltkreise und von Zellzustandsübergängen genutzt.

Das HIVEP3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Hivep3-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Hivep3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Hivep3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die HIVEP3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Hivep3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der HIVEP3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Hivep3-Exone abzielen, die für die HIVEP3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Hivep3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom HIVEP3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom HIVEP3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Hivep3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das HIVEP3 HDR-Plasmid (m) und HIVEP3 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Hivep3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Hivep3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.