Plasmide Double Nickase (h) Histone Deacetylase 9 (HDAC9): sc-401419-NIC

HDAC9 code l’histone désacétylase 9, une HDAC de classe IIa qui agit comme corégulateur transcriptionnel sensible aux signaux, reliant le remodelage de la chromatine aux signaux environnementaux. HDAC9 fait la navette entre le noyau et le cytoplasme et module des programmes d’expression génique via des complexes contenant des HDAC, influençant l’équilibre de l’acétylation des histones, l’activité des enhancers et la transcription spécifique de lignée. Elle s’intègre aux voies contrôlées par les facteurs de transcription de la famille MEF2 ainsi qu’à des mécanismes épigénétiques plus larges qui régissent la différenciation cellulaire, le métabolisme et les réponses au stress. Une expression ou une activité altérée de HDAC9 a été associée à des réseaux transcriptionnels dérégulés pertinents pour la biologie cardiovasculaire, la fonction des cellules immunitaires et des phénotypes oncogéniques, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques de la régulation épigénétique.

Histone Deacetylase 9 (HDAC9) Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HDAC9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HDAC9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HDAC9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HDAC9.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.