HCF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403097

Descripción general

HCFC1 codifica el factor de célula huésped 1 (HCF1), un corre­gulador transcripcional asociado a la cromatina que conecta factores de transcripción específicos de secuencia con complejos modificadores de histonas para coordinar los programas de expresión génica necesarios para la progresión del ciclo celular y la identidad celular. HCF1 participa en el control epigenético de promotores y potenciadores (enhancers), respaldando vías vinculadas a la transición G1/S, la competencia para la replicación del ADN y la homeostasis transcripcional. La alteración de la función de HCFC1 se ha implicado en fenotipos del neurodesarrollo y en discapacidad intelectual ligada al cromosoma X, y las redes transcripcionales dependientes de HCF1 también se estudian en el contexto de la proliferación oncogénica. Como nodo de remodelación de la cromatina y ensamblaje de factores de transcripción, HCF1 se investiga con frecuencia en estudios de regulación de promotores, control del ciclo celular y circuitos de expresión génica a escala genómica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HCF1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HCFC1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HCFC1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HCFC1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HCF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HCFC1 para la investigación de la señalización de HCF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HCFC1 críticos para la función de HCF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HCFC1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HCF1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HCF1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HCFC1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HCF1 (h) y el plásmido HDR HCF1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HCFC1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HCFC1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.