GRSF-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405858

Descripción general

GRSF1 codifica GRSF-1, una proteína de unión al ARN enriquecida en las mitocondrias que reconoce elementos de ARN ricos en guanina y favorece el control posranscripcional de la expresión génica mitocondrial. Participa en el procesamiento, la estabilidad y la traducción del ARN mitocondrial, influyendo así en la fosforilación oxidativa, la función del ribosoma mitocondrial y la bioenergética celular. A través de estas funciones, GRSF-1 vincula el metabolismo del ARN con las respuestas al estrés y el mantenimiento de la homeostasis mitocondrial. La actividad alterada de GRSF1 se ha investigado en contextos de disfunción mitocondrial, incluida la neurodegeneración y la remodelación metabólica asociada al cáncer, donde los programas de expresión génica mitocondrial se alteran con frecuencia.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GRSF-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GRSF1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GRSF1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GRSF1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GRSF-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GRSF1 para la investigación de la señalización de GRSF-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GRSF1 críticos para la función de GRSF-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GRSF1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GRSF-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GRSF-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GRSF1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GRSF-1 (h) y el plásmido HDR GRSF-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GRSF1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GRSF1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.