Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO GRK 4 (h): sc-402816
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GRK 4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GRK 4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GRK 4 Antibody (D-11): sc-376891
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GRK 4 (h) | sc-402816 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
GRK4 code la kinase 4 des récepteurs couplés aux protéines G (GRK4), une sérine/thréonine kinase qui phosphoryle les RCPG activés afin de favoriser le recrutement de la β-arrestine, la désensibilisation du récepteur et son trafic intracellulaire. L’activité de GRK4 influe sur la dynamique de signalisation de voies liées à l’AMPc/PKA et aux sorties MAPK en aval, en modulant l’intensité et la durée des réponses médiées par les récepteurs. Dans des contextes pertinents pour le rein et le système vasculaire, GRK4 a été étudiée pour ses effets sur la régulation des récepteurs dopaminergiques et la gestion du sodium, ce qui l’associe à des phénotypes de régulation de la pression artérielle. Une expression modifiée de GRK4 ou des variants fonctionnels ont été associés à des domaines de recherche cardiovasculaire et rénale où l’homéostasie de la signalisation des RCPG est perturbée.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GRK 4 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GRK4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GRK4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GRK4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GRK 4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GRK4 pour l'étude de la signalisation de GRK 4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de GRK4 essentiels à la fonction de GRK 4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GRK4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GRK 4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le GRK 4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GRK4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GRK 4 plasmide HDR (h) et le GRK 4 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GRK4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GRK4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.