Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GRK 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406525
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GRK 1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GRK 1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GRK 1 Anticuerpo (D11): sc-56910
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GRK 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406525 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
GRK1 codifica la cinasa 1 de receptores acoplados a proteína G (cinasa de la rodopsina), una cinasa de serina/treonina que fosforila la rodopsina activada por la luz para favorecer la unión de arrestina y la terminación oportuna de la fototransducción en los fotorreceptores de bastones. Esta actividad es fundamental para la desensibilización de los GPCR y la adaptación de la señal en la retina, coordinando la cinética de recuperación y limitando la señalización prolongada aguas abajo. La alteración de la función de GRK1 se asocia con trastornos retinianos hereditarios, incluida la ceguera nocturna congénita estacionaria, lo que refleja una desactivación deficiente de la señalización en bastones. Por ello, GRK1 se estudia ampliamente en las vías que regulan los GPCR, las respuestas al estrés vinculadas al ciclo visual y la homeostasis de los fotorreceptores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GRK 1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GRK1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GRK1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GRK1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GRK 1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GRK1 para la investigación de la señalización de GRK 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GRK1 críticos para la función de GRK 1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GRK1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GRK 1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GRK 1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GRK1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GRK 1 (h) y el plásmido HDR GRK 1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GRK1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GRK1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.