Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GGTase-IIβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406913
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- GGTase-IIβ El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico GGTase-IIβ, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GGTase-IIβ Anticuerpo (B-8): sc-365926
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
GGTase-IIβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406913 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RABGGTB codifica la subunidad beta de la geranilgeraniltransferasa de Rab (GGTasa-IIβ), un componente central de la enzima heterodimérica que cataliza la geranilgeranilación de las GTPasas Rab. Esta modificación lipídica es esencial para la asociación de Rab a membranas y para sus funciones de tráfico, que regulan la gemación de vesículas, la clasificación endosomal, la dinámica de membranas relacionada con la autofagia y la secreción regulada. A través de su impacto en las rutas de transporte dependientes de Rab, la GGTasa-IIβ influye en la identidad de los orgánulos y en la compartimentalización de la señalización en todo el sistema endomembranoso. La desregulación de la prenilación de Rab y del tráfico vesicular se ha vinculado con la neurodegeneración, la disfunción inmunitaria y alteraciones asociadas al cáncer en el transporte de membranas y el reciclaje de receptores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO GGTase-IIβ (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RABGGTB en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RABGGTB junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RABGGTB tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GGTase-IIβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RABGGTB para la investigación de la señalización de GGTase-IIβ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RABGGTB críticos para la función de GGTase-IIβ
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RABGGTB para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido GGTase-IIβ CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GGTase-IIβ CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RABGGTB. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GGTase-IIβ (h) y el plásmido HDR GGTase-IIβ (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RABGGTB para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RABGGTB definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.