GATA-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420498

概要

マウスのGata6は、亜鉛フィンガー型転写因子GATA-6をコードしており、胚発生および成体組織の恒常性維持における内胚葉系譜の運命決定や上皮分化の主要な制御因子です。GATA-6は、細胞運命の選択、形態形成、器官発生を制御する遺伝子プログラムを調節し、呼吸器系や消化管系に関わる過程も含まれます。また、発生に関わる転写ネットワークや、WNT、BMP/TGF-β、FGFなどのシグナル伝達経路と統合され、状況依存的な転写出力を協調的に制御します。GATA-6活性の異常は、発生異常や分化状態の変化と関連づけられており、先天異常のモデル化や、疾患に伴う組織リモデリング機構の解明において重要です。

GATA-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGata6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gata6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gata6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GATA-6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GATA-6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gata6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GATA-6の機能に不可欠なGata6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gata6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GATA-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGATA-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gata6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GATA-6 HDRプラスミド（m）および GATA-6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGata6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGata6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。