galectin-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421420

概要

マウスのLgals9は、β-ガラクトシド結合性レクチンであるガレクチン-9をコードしており、糖鎖依存的な細胞–細胞間および細胞–細胞外マトリックス間の相互作用に関与し、免疫・炎症シグナル伝達の形成に寄与します。ガレクチン-9は白血球の活性化、接着、遊走を調節し、サイトカイン応答、T細胞制御、骨髄系細胞の分極化を司る経路との関連が示されています。免疫調節と組織恒常性における役割から、Lgals9は自己免疫、感染症、アレルギー、腫瘍免疫のモデルで頻繁に研究されるほか、線維化や慢性炎症といった文脈でも注目されています。また、ガレクチン-9発現の変化は、アポトーシス感受性やストレス応答の変動とも関連し、疾患に関わる微小環境に影響を及ぼすことが示唆されています。

galectin-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるLgals9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lgals9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lgals9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、galectin-9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、galectin-9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lgals9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• galectin-9の機能に不可欠なLgals9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lgals9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• galectin-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびgalectin-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lgals9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  galectin-9 HDRプラスミド（m）および galectin-9 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLgals9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLgals9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。