galectin-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424987

概要

マウスのLgals8は、タンデムリピート型のβ-ガラクトシド結合レクチンであるガレクチン-8をコードしており、細胞表面および細胞外マトリックス蛋白質上の糖鎖を認識することで、細胞接着、遊走、ならびにインテグリン依存性シグナル伝達を制御する。ガレクチン-8は、破綻したエンド膜に露出した宿主糖鎖に結合することで損傷センサーとして働き、選択的オートファジーを促進するとともに、細胞内ストレスや感染に対する自然免疫応答を統合的に調整する。さらに、レクチン依存的な架橋形成とシグナル伝達を介して炎症性サイトカインネットワークおよび細胞恒常性を調節し、エンドサイトーシス、細胞骨格動態、小胞輸送を制御する経路とも交差する。ガレクチン-8活性の破綻は、炎症状態の変化、線維化に関連したリモデリング、腫瘍微小環境の生物学的特性の変容と関連づけられており、マウスモデルにおける免疫制御および組織病理の機序研究において重要な対象となる。

galectin-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるLgals8遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lgals8内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lgals8のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、galectin-8タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、galectin-8シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lgals8欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• galectin-8の機能に不可欠なLgals8エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lgals8ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• galectin-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびgalectin-8 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lgals8遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  galectin-8 HDRプラスミド（m）および galectin-8 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLgals8ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLgals8標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。