Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FRRS1L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407611
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FRRS1L El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FRRS1L, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FRRS1L Anticuerpo (H-8): sc-398692
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FRRS1L Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407611 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FRRS1L (similar a la reductasa de quelato férrico 1) codifica una proteína asociada al retículo endoplásmico implicada en la biogénesis y la regulación funcional de los receptores de glutamato tipo AMPA, influyendo en la transmisión sináptica excitatoria y la actividad de las redes neuronales. FRRS1L participa en procesos que controlan el ensamblaje, el tráfico y la expresión en superficie de los receptores, impactando así en vías de señalización relacionadas con la plasticidad sináptica. La alteración de la función de FRRS1L se ha vinculado a fenotipos del neurodesarrollo y epilépticos, lo que la hace relevante para estudiar mecanismos de sinaptopatía y disfunción neuronal dependiente de la actividad. Su enriquecimiento neuronal y su papel en la señalización glutamatérgica respaldan su uso para modelar consecuencias a nivel de circuito derivadas de cambios en la homeostasis de los receptores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FRRS1L (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FRRS1L en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FRRS1L junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FRRS1L tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FRRS1L.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FRRS1L para la investigación de la señalización de FRRS1L, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FRRS1L críticos para la función de FRRS1L
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FRRS1L para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FRRS1L CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FRRS1L CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FRRS1L. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FRRS1L (h) y el plásmido HDR FRRS1L (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FRRS1L para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FRRS1L definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.