FOXL2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403351

Übersicht

FOXL2 ist ein Forkhead-Box-Transkriptionsfaktor, der eine zentrale Rolle bei der Differenzierung von Granulosazellen, der Ovarialfollikulogenese und der Aufrechterhaltung der ovariellen Identität spielt. Durch die Bindung an cis-regulatorische Elemente und die Koordination chromatinassoziierter Transkriptionsprogramme integriert FOXL2 Signaleingänge, die die Steroidogenese, die Zellzykluskontrolle und die Apoptose in reproduktiven Geweben steuern. Eine dysregulierte FOXL2-Aktivität stört entwicklungsbiologische Gen-Netzwerke und ist eng mit Störungen der Geschlechtsentwicklung sowie der Ovarialpathobiologie verknüpft, einschließlich wiederkehrender somatischer Veränderungen, wie sie bei adulten Granulosazelltumoren beobachtet werden. Als nuklearer Regulator mit linienbestimmenden Funktionen wird FOXL2 umfassend in Signalwegen untersucht, die die reproduktive Endokrinologie, die Transkriptionsregulation und die gewebespezifische Tumorbiologie betreffen.

Das FOXL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FOXL2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FOXL2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FOXL2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FOXL2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FOXL2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FOXL2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FOXL2-Exone abzielen, die für die FOXL2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FOXL2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FOXL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FOXL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FOXL2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FOXL2 HDR-Plasmid (h) und FOXL2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FOXL2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FOXL2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.