FOXL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403351

概要

FOXL2はフォークヘッドボックス型の転写因子であり、顆粒膜細胞の分化、卵巣卵胞形成、ならびに卵巣アイデンティティの維持において中心的な役割を担います。FOXL2はシス制御エレメントに結合し、クロマチン関連の転写プログラムを協調的に制御することで、ステロイド産生、細胞周期制御、アポトーシスといった生殖組織における過程を形作るシグナル入力を統合します。FOXL2活性の制御異常は発生過程の遺伝子ネットワークを攪乱し、性分化疾患や卵巣の病態と強く関連しています。その中には、成人型顆粒膜細胞腫で反復して観察される体細胞変異も含まれます。系譜を規定する機能をもつ核内制御因子として、FOXL2は生殖内分泌、転写制御、組織特異的ながん生物学を司る経路の研究で広く注目されています。

FOXL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFOXL2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FOXL2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FOXL2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FOXL2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FOXL2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FOXL2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FOXL2の機能に不可欠なFOXL2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FOXL2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FOXL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびFOXL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FOXL2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FOXL2 HDRプラスミド（h）および FOXL2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFOXL2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFOXL2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。