Plásmido Doble Nickase (h) FOXC1: sc-403113-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FOXC1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FOXC1 (h) y el plásmido de doble nickasa FOXC1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FOXC1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FOXC1 Anticuerpo (4D11): sc-293455
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FOXC1 | sc-403113-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FOXC1 | sc-403113-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FOXC1 (forkhead box C1) es un factor de transcripción de tipo hélice alada que regula programas de expresión génica que controlan el desarrollo embrionario, la especificación del destino celular y el patrón de los tejidos, con funciones destacadas en la formación del segmento anterior del ojo, la morfogénesis craneofacial y la biología vascular. Mediante la unión al ADN dependiente de secuencia, FOXC1 coordina redes transcripcionales que convergen con vías de señalización del desarrollo como TGF-β/BMP y Wnt, moldeando decisiones de linaje y la remodelación de la matriz extracelular. La actividad desregulada de FOXC1 se ha vinculado con disgenesia congénita del segmento anterior, incluidos fenotipos del espectro de Axenfeld–Rieger, y contribuye a estados transcripcionales aberrantes observados en múltiples cánceres. En modelos celulares, FOXC1 se estudia a menudo por su influencia en la transición epitelio-mesénquima, fenotipos tipo “stem” y efectos dependientes del contexto sobre la proliferación, la migración y las respuestas al estrés.
FOXC1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FOXC1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FOXC1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FOXC1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FOXC1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.