Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fos B (h): sc-400306
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Fos B Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Fos B, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Fos B Antibody (F-7): sc-398595
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fos B (h) | sc-400306 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
FOSB code pour Fos B, un facteur de transcription à réponse immédiate du complexe AP-1 qui dimérise avec des protéines de la famille JUN afin de réguler l’expression génique dépendante des stimuli. Fos B intègre des signaux issus des voies MAPK/ERK, du calcium et de l’AMPc pour contrôler des programmes liés à la prolifération cellulaire, à la différenciation, à la survie et à la plasticité synaptique. Son induction rapide après exposition à des facteurs de croissance, au stress et à l’activité neuronale en fait un marqueur et un médiateur utile de la transcription dépendante de l’activité. Une dérégulation de la signalisation FOSB/AP-1 a été associée à la transformation oncogénique et à l’invasion dans de multiples contextes tissulaires, ainsi qu’à un remodelage transcriptionnel lié à des troubles neuropsychiatriques et à des processus neurodégénératifs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Fos B (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FOSB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FOSB, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FOSB à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Fos B.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FOSB pour l'étude de la signalisation de Fos B, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de FOSB essentiels à la fonction de Fos B
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FOSB pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Fos B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Fos B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FOSB. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Fos B plasmide HDR (h) et le Fos B (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FOSB pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FOSB définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.