FNIP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-409140

Übersicht

FNIP2 (Folliculin-interagierendes Protein 2) ist ein zytoplasmatischer Bindungspartner des Tumorsuppressors FLCN und wirkt in Signalwegen der Nährstoffsensorik und der Energiehomöostase. Es trägt zur Regulation der AMPK–mTOR-Achse bei und ist an lysosomenassoziierten Prozessen beteiligt, die die Verfügbarkeit von Aminosäuren mit der metabolischen Anpassung koppeln, mit nachgeschalteten Effekten auf Autophagie und die Kontrolle des Zellwachstums. Über seine Interaktionen mit FLCN und verwandten Komplexen beeinflusst FNIP2 die Mitochondrienfunktion und Stressantworten in metabolisch aktiven Geweben. Eine Fehlregulation der FLCN–FNIP-Signalgebung wurde mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die an erblichen Tumorprädispositionen und allgemeineren Mechanismen metabolischer Erkrankungen beteiligt sind, was ihre Relevanz für Studien zu Zellwachstum und Homöostase unterstreicht.

Das FNIP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FNIP2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FNIP2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FNIP2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FNIP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FNIP2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FNIP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FNIP2-Exone abzielen, die für die FNIP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FNIP2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FNIP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FNIP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FNIP2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FNIP2 HDR-Plasmid (h) und FNIP2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FNIP2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FNIP2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.