Particules Lentivirales d'Activation (m) FGF-1: sc-420323-LAC

Le gène murin *Fgf1* code le facteur de croissance des fibroblastes 1 (FGF-1), un facteur de croissance se liant au sulfate d’héparane qui transmet des signaux via les tyrosine kinases FGFR pour réguler la prolifération, la survie, la migration et la différenciation cellulaires. FGF-1 active des cascades canoniques dépendantes des récepteurs, notamment les voies MAPK/ERK, PI3K–AKT et PLCγ–PKC, coordonnant les réponses angiogéniques, le remodelage tissulaire et la communication stroma–épithélium. En recherche biomédicale, les altérations de la signalisation FGF/FGFR sont fréquemment étudiées dans des contextes tels qu’une vascularisation aberrante, la fibrose et le remaniement de voies oncogéniques, où FGF-1 peut moduler les signaux du microenvironnement et l’état cellulaire. *Fgf1* est également étudié pour son rôle dans les réponses au stress et les processus régénératifs qui influencent la réparation des plaies et l’adaptation métabolique dans des modèles murins.

Les particules d'activation lentivirales FGF-1 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Fgf1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales FGF-1 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Fgf1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de FGF-1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Fgf1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.