FBXO3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425412

Descripción general

Fbxo3 codifica la proteína con dominio F-box FBXO3 en ratón, un componente de reconocimiento de sustratos de los complejos ligasa E3 de ubiquitina SCF (SKP1–CUL1–RBX1), que ayudan a controlar la proteostasis mediante el recambio proteico dependiente de ubiquitina. Al dirigir la ubiquitinación selectiva, FBXO3 influye en la dinámica de la señalización celular, en los programas del ciclo celular y de respuesta al estrés, y en la estabilidad de reguladores de vías. La actividad alterada dentro de las redes SCF–F-box se ha asociado con inflamación desregulada y con una señalización inmunitaria más amplia, así como con cambios en la homeostasis celular relevantes para la biología de enfermedades. Estas características hacen de Fbxo3 un nodo útil para estudiar el control, por parte de la vía ubiquitina–proteasoma, de la señalización y del fenotipo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FBXO3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Fbxo3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Fbxo3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Fbxo3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FBXO3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Fbxo3 para la investigación de la señalización de FBXO3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Fbxo3 críticos para la función de FBXO3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Fbxo3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FBXO3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FBXO3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Fbxo3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FBXO3 (m) y el plásmido HDR FBXO3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Fbxo3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Fbxo3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.