FAF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420281
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FAF1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FAF1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FAF1 Anticuerpo (E-4): sc-393965
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FAF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420281 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El factor asociado a Fas 1 (FAF1), codificado por el gen murino Faf1, es un adaptador multifuncional implicado en la regulación de la apoptosis y el control de calidad de las proteínas. FAF1 participa en complejos de señalización asociados a receptores de muerte y modula vías dependientes de caspasas, al tiempo que interactúa con componentes del sistema ubiquitina–proteasoma para influir en la ubiquitinación y el recambio de proteínas de señalización. A través de estas actividades, FAF1 conecta las respuestas al estrés con las decisiones sobre el destino celular y contribuye al mantenimiento de la homeostasis celular. La expresión o función desregulada de FAF1 se ha asociado con una sensibilidad apoptótica alterada y se ha investigado en contextos que incluyen la neurodegeneración, la regulación inmunitaria y la señalización relacionada con el cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAF1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Faf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Faf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Faf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAF1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Faf1 para la investigación de la señalización de FAF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Faf1 críticos para la función de FAF1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Faf1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FAF1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido FAF1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Faf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAF1 (m) y el plásmido HDR FAF1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Faf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Faf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.