ephrin-A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401309-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ephrin-A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ephrin-A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ephrin-A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EFNA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ephrin-A1 Anticorpo (A-5): sc-377362
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ephrin-A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401309-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ephrin-A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401309-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EFNA1 codifica a efrina-A1, um ligante de membrana ancorado por glicosilfosfatidilinositol (GPI) para as tirosina-quinases receptoras EphA, que medeia sinalização dependente de contato entre células adjacentes. A interação efrina-A1–EphA regula a adesão e a repulsão celular, a formação de fronteiras e a migração coordenada por meio de vias que se cruzam com GTPases da família Rho, sinalização por MAPK e remodelamento do citoesqueleto. Em contextos endoteliais e epiteliais, a efrina-A1 contribui para o brotamento angiogênico, o padrão tecidual e a modulação de sinais inflamatórios e de fatores de crescimento. A desregulação da sinalização EFNA1/EphA tem sido associada a alterações no remodelamento vascular e a comportamentos celulares invasivos, tornando-a um nó útil para estudos mecanísticos de sinalização dependente do microambiente e de interações estromais associadas a tumores.
ephrin-A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EFNA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EFNA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EFNA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EFNA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.